2020年自考11973水產(chǎn)繁殖育苗技術(shù)復(fù)習(xí)資料（9）

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        41、造成雜交不孕和雜種不育的原因是什么?(第項5分)

        答案：

        造成雜交不孕和雜種不育的原因是由于物種之間存在的生殖隔離。造成生殖隔離的原因：

        1、地理隔離

        由于地理因素造成的隔離,如不同的水域之間、不同的河流之間造成群體之間的不可相遇而形成兩個群體之間的隔離,長期的隔離阻斷了兩物種之間的基因流動,進(jìn)而導(dǎo)致生殖隔離。

        2、季節(jié)隔離

        由于動物繁殖季節(jié)不同,即使在同一地區(qū)也無法交配,因而造成的隔離。如大麻哈魚溯河生殖的時期不同導(dǎo)致不同群體間的生殖隔離。

        3、生理隔離

        動物存在性選擇,只選擇或接受同種的異性個體交配,而拒絕異種的異性個體。

       42、生殖隔離有哪幾種?如何克服?(第項5分)

        答案：

        1、地理隔離

        由于地理因素造成的隔離,如不同的水域之間、不同的河流之間造成群體之間的不可相遇而形成兩個群體之間的隔離,長期的隔離阻斷了兩物種之間的基因流動,進(jìn)而導(dǎo)致生殖隔離。

        2、季節(jié)隔離

        由于動物繁殖季節(jié)不同,即使在同一地區(qū)也無法交配,因而造成的隔離。如大麻哈魚溯河生殖的時期不同導(dǎo)致不同群體間的生殖隔離。

        3、生理隔離

        動物存在性選擇,只選擇或接受同種的異性個體交配,而拒絕異種的異性個體。

        無論是哪一種類型,均可通過人工授精打破生殖隔離。

       43、遠(yuǎn)緣雜交的可育性分為哪幾種情況?(第項5分)

        答案：

        1、種間雜種

        同一屬內(nèi)的不同種間雜交,比屬間雜交的可育性大,有許多完全可育(全育型)的種類。

        2、屬間雜種

        (1)完全可育:雜種一代不論雌雄均能發(fā)育?？扇窟_(dá)到性成熟,其性腺指數(shù)、懷卵量、精子數(shù)量接近親本,受精率、孵化率正常,如鳊魴雜種、鰱鳙雜種。

        (2)完全不育:雜種性腺不發(fā)育。

        (3)單性可育:雜種只有雄性或雌性能發(fā)育到性成熟,另一性別則不發(fā)育。如鯉鯽雜種(目前發(fā)現(xiàn)部分雄性個體是可育的)。

        3、亞科間雜種

        不同亞科間的遠(yuǎn)緣雜交,至今未見報道能育的雜種,一般認(rèn)為是不育的。亞科間雜種的完全不育,可能與雜交不親和性很難產(chǎn)生二倍體的雜種有關(guān)。

       44、多倍體是怎樣形成的?(第三項6分，其余每項3分)

        答案：

        1、體細(xì)胞染色體加倍

        核內(nèi)有絲分裂是體細(xì)胞在正常有絲分裂中,染色體復(fù)制一次,但至分裂中期,核膜沒有破裂、消失,也無紡錘絲的形成, 因此每對染色體形成4條染色體,稱為雙倍染色體。這時染色體兩兩平行排列在一起,結(jié)果形成的細(xì)胞是四倍體。其后經(jīng)過正常的細(xì)胞分裂,形成兩個子細(xì)胞均為四倍體。

        2、生殖細(xì)胞的異常減數(shù)分裂

        由于某種原因同源染色體或姐妹染色單體在后期沒有分開,二組染色體進(jìn)人到同一配子中,導(dǎo)致配子中染色體數(shù)目的加倍形成2n 配子。這樣的配子經(jīng)受精后形成倍性不同于親代的多倍體,如三倍體、四倍體等,但其子代的可育性很低。

        3、雙(多)精受精

        動物的受精機(jī)制保證只有一個精子進(jìn)人卵子。在一些魚類中：

        精子→雄配子素Ⅱ→溶解卵膜孔的卵膜形成受精孔→卵子的雌配子素I→吸引和加速精子人卵→雌配子素Ⅱ→卵膜孔封閉→破壞孔外精子→單精受精→精卵兩核的融合。

        當(dāng)受精孔由于某些生理的或自然的原因不能及時封閉時,則可能有兩個或多個精子入卵, 形成三倍體(雙精)、四倍體(三精)的合子并發(fā)育形成多倍體個體。

        4、遠(yuǎn)緣雜交

        不同二倍體物種之間雜交,當(dāng)血緣關(guān)系比較近時形成異源二倍體雜交種;當(dāng)雜交的兩個物種血緣關(guān)系較遠(yuǎn),會產(chǎn)生雜交種不育現(xiàn)象;如果遺傳基礎(chǔ)差異較大,雜交很難獲得二倍體雜種,但有時遠(yuǎn)緣雜交可以導(dǎo)致遠(yuǎn)緣多倍體的形成。

       45、多倍體的應(yīng)用主要體現(xiàn)在哪幾方面?(第四項6分，其余每項3分)

        答案：

        1、染色體計數(shù)法(貝類染色體制片法)

        用擔(dān)輪幼蟲制備染色體標(biāo)本(以皺紋盤鮑為例)

        受精卵在25℃條件下培養(yǎng)6~8h,取上浮擔(dān)輪幼蟲,用0.01%的秋水仙素(用于制備中期染色體)溶液浸泡處理2~3h;離心5min(1000r/min);用0.075mol/L的KCl預(yù)低滲10min,離心5min(1000r/min),再用0.075mol/L KCl低滲30min,離心5min(1000r/min) ;用卡諾固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)預(yù)固定15min,離心5min(1000r/min);重復(fù)固定4次(每次15min) ;置于-18℃冰箱中儲存過夜(>12h) ;離心5min(1000r/min);加50%冰醋酸1~2滴解離1~2min;滴片前用固定液(甲醇:冰醋酸=1:1)固定;在50℃ 燈箱上進(jìn)行熱滴片;自然干燥后,用Giemsa染液染色1h;用蒸餾水沖洗后,在空氣中干燥;鏡檢統(tǒng)計染色體數(shù)。

        2、細(xì)胞核體積測量

        一般認(rèn)為,真核細(xì)胞的核大小與染色體數(shù)目成正比,同時細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)在細(xì)胞中總是維持較穩(wěn)定的核質(zhì)比。因此,細(xì)胞及細(xì)胞核體積的大小可用于染色體倍性鑒定。根據(jù)細(xì)胞核或細(xì)胞的體積即可確定其倍性。計算公式：核面積=πab/4;核體積=4/3πab2或=ab2/1.91式中,a為短軸長度,b為長軸長度。

        二倍體與三倍體紅細(xì)胞核體積預(yù)期比值為1:1.5,核面積預(yù)期比值為1:1.3,二倍體與四倍體紅細(xì)胞核體積預(yù)期比值為1:1.74。

        3、極體計數(shù)法

        因為三倍體的誘導(dǎo)是通過阻止第一極體或第二極體的排出而完成的,所以三倍體合子只有一個而不是兩個極體。具體方法是在顯微鏡下觀察卵子的動物極有沒有極體釋放。該方法在大扇貝和珍珠貝中很有效,但對于早期胚胎極體不易觀察的種類則需通過組織學(xué)方法觀察極體的釋放。

        4、DNA含量測定方法

        (1)流式細(xì)胞儀檢測

        用DNA-RNA特異性熒光染料(如DAPI)對細(xì)胞進(jìn)行染色,在流式細(xì)胞儀上用激光或紫外光激發(fā)結(jié)合在DNA上的熒光染料,檢測每個細(xì)胞的熒光強(qiáng)度,其強(qiáng)度與DNA含量成正比，與已知的二倍體細(xì)胞或單倍體細(xì)胞(如同種的精子)熒光強(qiáng)度對比,判斷被檢查細(xì)胞群體的倍性組成。

        (2)顯微熒光測定法

        將被測材料用固定液固定后,將組織用細(xì)胞勻漿儀弄碎,使細(xì)胞游離,制成涂片標(biāo)本,或者采取血液制成血涂片。標(biāo)本用DAPI染色,然后在顯微分光光度計上,通過波長365nm的紫外線照射,用掃描測光裝置測定細(xì)胞核的熒光強(qiáng)度,獲得處理組個體和對照組個體之間細(xì)胞核DNA相對含量曲線,從而測出二者的DNA比率,即可確定處理組個體的倍性,進(jìn)而計算出三倍體的誘發(fā)率。

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